細(xì)胞裂解液Laemmli Buffer(4×)
一、產(chǎn)品介紹。
Laemmli Buffer(4×)是一種 4 倍濃度的細(xì)胞裂解液,含有蛋白變性劑 SDS,與溫和的細(xì)胞裂解液(如 RIPA 裂解液)制備的細(xì)胞裂解產(chǎn)物混合后使蛋白變性,進(jìn)行 SDS-PAGE 分析。
二、運輸與存儲條件。
本產(chǎn)品常溫運輸和保存,有效期 3 年。
三、特點與優(yōu)勢。
1. 本產(chǎn)品兼具蛋白變性和 Loading Buffer 的作用,與溫和裂解液制備的細(xì)胞裂解產(chǎn)物混合后,進(jìn)行 SDS-PAGE 分析。
四、自備試劑。
β-巰基乙醇(β-ME)或二硫蘇糖醇(DTT)。
五、使用說明。
1. 與非變性細(xì)胞裂解液制備的細(xì)胞裂解產(chǎn)物按照 1:3 的比例混合,100 ℃煮沸 5 min,冰水混合物中冷卻,12,000 rpm,4 ℃離心 5 min,上清轉(zhuǎn)移至新的 EP 管。
2. 蛋白濃度測定。利用 BCA 法測定細(xì)胞裂解液中的蛋白濃度,并計算上樣體積。
3. SDS-PAGE 分析。細(xì)胞裂解液中加入還原劑,如 β-ME(終濃度為 5%)或 DTT(終濃度為 100 mM),混勻,進(jìn)行 SDS-PAGE 分析。
六、注意事項。
1. 本產(chǎn)品與 Bio-Rad 公司出品的 Laemmli Buffer(4×)具有同樣的裂解效果和使用方法。
2. 本產(chǎn)品不含還原劑,可以用 BCA 法測定蛋白濃度,后續(xù)可以根據(jù)需要,添加還原劑。
3. 實驗時請穿好實驗服、佩戴乳膠手套和安全眼鏡。
關(guān)鍵字: 細(xì)胞裂解液;Laemmli Buffer(4×);
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