"NCI-H209:人小細胞肺癌復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞生長：貼壁

可以這樣說，對于需要消化傳代的細胞，每一次的消化都是對這個細胞存活與否，狀態(tài)HAO與不HAO至關(guān)重要的考驗。很多同學(xué)都遇到過這個問題，自己養(yǎng)的細胞開始的幾代長的還挺HAO的，可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細胞不行了，狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題，可以非?？隙ǖ卣f，你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細胞受到較大損傷了。所以，越長越差。在消化的過程中，你加入胰酶后，所有細胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個問題就是，細胞的生長狀態(tài)是不一樣的，每一個細胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細胞消化同樣的時間對細胞是不公平的，他們受到了差別待遇當然會有脾氣的，大家爭取做到因材施教，比如試試下面的“四步消化法”。（以難消化細胞為例），具體操作：1)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗1-2遍（目的是將漂浮著的死細胞之類盡量洗掉）。2)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過的細胞對比觀察看誰長的更HAO一點就知道該細胞對胰酶的敏感度了）3)吸干凈瓶內(nèi)剩余液體，加入0.3ml左右的胰酶潤洗一遍，吸掉棄之，再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察，待細胞與細胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打2-3遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用2ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。(也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對比)4)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細胞。當然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細胞間隙明顯，細胞獨立開來的時候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據(jù)實際情況把握）。

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

SW 837細胞類似產(chǎn)品：：NCIH2122細胞、NCM-460細胞、Kasumi-1細胞

MAVER1細胞類似產(chǎn)品：：SNU-761細胞、HuNS1細胞、FF-WT-BJ細胞

RT-BM細胞類似產(chǎn)品：：DHL6細胞、H-740細胞、OKAC1細胞

2B4-L細胞類似產(chǎn)品：：SKNF1細胞、Hs 343.T細胞、GM04680細胞

[細胞產(chǎn)品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

NCI-H209:人小細胞肺癌復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

SW-1573細胞類似產(chǎn)品：：MDBK (NBL-1)細胞、IM 9細胞、NR 8383細胞

SkMel31細胞類似產(chǎn)品：：CWR22R-V1細胞、LS-174細胞、32D:cl3細胞

NCIH596細胞類似產(chǎn)品：：Tu-212細胞、NCIH2066細胞、CL1細胞

細胞傳代培養(yǎng)的胰酶消化法：傳代培養(yǎng)：是指細胞從一個培養(yǎng)瓶以１：２或１：２以上的比例轉(zhuǎn)移，接種到另一培養(yǎng)瓶的培養(yǎng)。傳代細胞，可根據(jù)不同細胞采取不同的方法進行細胞傳代。貼壁生長的細胞用消化法傳代，部分貼壁的細胞用直接吹打或用硅膠軟刮的刮除法傳代。懸浮細胞可采用加入等量新鮮培養(yǎng)基后直接吹打分散進行傳代，或用自然沉降法加入新培養(yǎng)基后再吹打分散進行傳代。實驗步驟：①入無菌室之前用肥皂洗手，再用７５% 的酒精擦拭消毒雙手；②倒置顯微鏡下觀察細胞形態(tài)，確定細胞是否傳代及細胞需要稀釋的倍數(shù)。將培養(yǎng)用液３７℃下預(yù)熱；③超凈臺臺面應(yīng)整潔，用７５%酒精棉球擦拭清潔；④打開超凈工作臺的紫外燈照射臺面２０min左右，關(guān)閉紫外燈，打開風(fēng)機清潔空氣除去臭氧；⑤點燃酒精燈;取出無菌試管，巴士德吸管和刻度吸管;安上橡皮頭;過酒精燈火焰略燒后插在無菌試管內(nèi)；⑥將培養(yǎng)用液瓶口用７５%酒精消毒，過酒精燈火焰后斜置于酒精燈旁的架子上；⑦倒掉培養(yǎng)細胞的舊培養(yǎng)基。酌情可用２-３ml Hanks液洗去殘留的就培養(yǎng)基，或用少量胰酶涮洗一下；⑧每個大培養(yǎng)瓶加入１ml胰酶，小培養(yǎng)瓶用量酌減，蓋HAO瓶蓋后在倒置顯微鏡下觀察。當細胞收回突起變圓時立即翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶，使細胞脫離胰酶，然后將胰酶倒掉。注意勿使細胞提早脫落入消化液中；⑨加入少量的含血清的新鮮培養(yǎng)基，反復(fù)吹打消化HAO的細胞使其脫壁并分散，再根據(jù)分傳瓶數(shù)補加一定量的含血清的新鮮培養(yǎng)基(７-１０ml/大瓶;３-５ml/小瓶)制成細胞懸液，然后分裝到新培養(yǎng)瓶中。蓋HAO瓶蓋，適度擰緊后稍回轉(zhuǎn)，以利于CO２的進入，將培養(yǎng)瓶放回CO２培養(yǎng)箱；⑩對懸浮培養(yǎng)細胞，步驟７-９不做。直接將細胞懸液進行離心去除舊培養(yǎng)基上清，加入新鮮培養(yǎng)基，然后分裝到各瓶中。

細胞傳代方法：１：２-１：４傳代；每周換液２次。

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

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細胞生長特性：懸浮生長，有少數(shù)細胞疏松貼壁

貼壁細胞傳代：去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基，T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次；棄PBS，再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細胞，顯微鏡下觀察，待細胞變圓，細胞間隙明顯，部分細胞剛開始脫離瓶壁，加4 ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化，將細胞小心吹打下來，1000rpm/min室溫離心5min；棄上清，細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細胞密度而定1:2-1:3，1:3-1:6，1:6-1:8），每T25瓶補足培養(yǎng)基至5-6ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。懸浮細胞傳代：一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中，稀釋細胞濃度即可，若培養(yǎng)液太多時，將細胞懸液移入離心管中，1000rpm/min 室溫離心5min。棄上清，細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細胞密度而定1:4-1:8），每T25瓶加完全培養(yǎng)液至4-5ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。有些懸浮細胞趨于成團生長，此時細胞生長狀態(tài)良HAO，當補液時，需避免反復(fù)吹打。

UPCI:SCC90細胞類似產(chǎn)品：：Jurkat (clone E6-1)細胞、NCIH1155細胞、GM00637B細胞

D-341Med細胞類似產(chǎn)品：：MT2細胞、hTERT-HPNE細胞、RPMI #8226細胞

BMU-S1細胞類似產(chǎn)品：：Caco 2細胞、NCI-H1781細胞、SW 982細胞

OVCA5細胞類似產(chǎn)品：：PANC-10-05細胞、ML2細胞、MDA-MB-134-VI細胞

MFE280細胞類似產(chǎn)品：：EBC1細胞、MG-63細胞、BaF3細胞

CAL78細胞類似產(chǎn)品：：MFE-296細胞、Hs 737.T細胞、OEC19細胞

MCF-7ADR細胞類似產(chǎn)品：：Walker-Ca.256細胞、KASUMI1細胞、EJ 138細胞

HMO6細胞類似產(chǎn)品：：NG 108-15細胞、CNE2Z細胞、H-378細胞

RIN-m5F細胞類似產(chǎn)品：：NCIN87細胞、CCC-HHM-2細胞、639V細胞

EBC1細胞類似產(chǎn)品：：Panc 04.03細胞、NK 10a細胞、KNS-62細胞

SKMel-5細胞類似產(chǎn)品：：WC00097細胞、Hepatoma-22細胞、HL-1細胞

PAI細胞類似產(chǎn)品：：UPCISCC090細胞、MS751細胞、H1404細胞

HIT clone T15細胞類似產(chǎn)品：：NL20細胞、SVEC4-10細胞、NW-38細胞

3396細胞類似產(chǎn)品：：MDA MB 361細胞、Panc 05.04細胞、PC-3M-2B4細胞

TEC細胞類似產(chǎn)品：：BNL.CL2細胞、SK Mel 2細胞、LM3細胞

Bovine Turbinate細胞類似產(chǎn)品：：MARC-145細胞、TCC-PAN2細胞、RPMI-1846細胞

Bovine Turbinate細胞類似產(chǎn)品：：MARC-145細胞、TCC-PAN2細胞、RPMI-1846細胞

H-920細胞類似產(chǎn)品：：JVM3細胞、SNU475細胞、NCIH2052細胞

H2085細胞類似產(chǎn)品：：Epstein-Barr-1細胞、MC3T3, E1 subgroup-4 clone細胞、H1618細胞

CL 1-5細胞類似產(chǎn)品：：PANC-1細胞、H-1563細胞、IBMF-7細胞

SW780細胞類似產(chǎn)品：：TOV-21G細胞、EB3 [Human Burkitt lymphoma]細胞、Vero E6細胞

SK MEL-28細胞類似產(chǎn)品：：Mv 1 Lu細胞、SK-ChA1細胞、RGCs細胞

PC 12細胞類似產(chǎn)品：：RPMI-2650細胞、RPMI 6666細胞、SKN-SH細胞

Embryonic Bovine Tracheal cells細胞類似產(chǎn)品：：NCM460細胞、HNE2細胞、DMS 153細胞

NCI-H209:人小細胞肺癌復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

PG-4 S+L-細胞類似產(chǎn)品：：PLMVEC細胞、SW-780細胞、HSC-3細胞

KOSC-2細胞類似產(chǎn)品：：OAW42細胞、Mel-MeWo細胞、T-ALL-1細胞

NCI-441細胞類似產(chǎn)品：：SGC-996細胞、HCC-1569細胞、A 253細胞

Bac1 2F5細胞類似產(chǎn)品：：X63Ag8.653細胞、PanC1細胞、Hu-P-T4細胞

ML-2細胞類似產(chǎn)品：：CAMA細胞、H2452細胞、NCIH508細胞

HO-8910PM細胞類似產(chǎn)品：：3T6細胞、TYKnu細胞、T98G細胞

HCC-366細胞類似產(chǎn)品：：NCIH2591細胞、A 549細胞、LC-1細胞

Bac1 2F5細胞類似產(chǎn)品：：X63Ag8.653細胞、PanC1細胞、Hu-P-T4細胞

NCIH2171細胞類似產(chǎn)品：：CAL-148細胞、NCI-H2073細胞、LICR-LON-HN6細胞

Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8細胞類似產(chǎn)品：：L 540細胞、RMC細胞、P3-X63-Ag8-653細胞

R 1610細胞類似產(chǎn)品：：E0771細胞、PA1細胞、MLE12細胞

HNE2細胞類似產(chǎn)品：：SKN-AS細胞、Panc-05.04細胞、HPAEC細胞

HCC1588細胞類似產(chǎn)品：：H-211細胞、MDA-kb2細胞、H-3255細胞

SG231細胞類似產(chǎn)品：：K7M2細胞、32Dc3細胞、MRMT-1細胞

Menschliche Und Tierische Zellkulture-1細胞類似產(chǎn)品：：NCIH1838細胞、H157細胞、SK 1細胞

Soleus clone 8細胞類似產(chǎn)品：：Rat Glomerular Endothelial細胞、HT 1080細胞、OCI-LY-10細胞

MHCCLM3細胞類似產(chǎn)品：：HCC0095細胞、H2110細胞、SNU-719細胞

RBL細胞類似產(chǎn)品：：MMAc.SF細胞、NK92MI細胞、H747細胞

HGC27細胞類似產(chǎn)品：：SK BR 03細胞、MDA-134細胞、Hep G2細胞

KY180細胞類似產(chǎn)品：：SW1353細胞、SW 1088細胞、RKO-E6細胞

MDA1386細胞類似產(chǎn)品：：BT-549細胞、CEM/C1細胞、MN-60細胞

MS1細胞類似產(chǎn)品：：H1522細胞、MS-751細胞、YES-2細胞

BE(2)M17細胞類似產(chǎn)品：：Mhh-Call 2細胞、MPP-89細胞、Normal Rat, August 3, 1983細胞

PLC PRF 5細胞類似產(chǎn)品：：RLE-6TN細胞、U-2932細胞、DMS-53細胞

JIMT-1細胞類似產(chǎn)品：：TFK1細胞、H-1568細胞、BJA-B細胞

HTori-3細胞類似產(chǎn)品：：LM6細胞、Hs 746T細胞、MUG-Chor1細胞

C4-2 B細胞類似產(chǎn)品：：AR41P細胞、EB-3細胞、Panc-813細胞

QBC(939)細胞類似產(chǎn)品：：HSC（Human Schwann）細胞、ARPE-19細胞、MuM-2C細胞

SCC25細胞類似產(chǎn)品：：Hs-940細胞、Intestinal Epithelioid Cell line No. 6細胞、P3-Jiyoye細胞

KM12 SM細胞類似產(chǎn)品：：Madin Darby Bovine Kidney細胞、SCH細胞、GAK細胞

293EBNA細胞類似產(chǎn)品：：GM-3573細胞、A375-MEL細胞、Hs-281-T細胞

OVCAR.3細胞類似產(chǎn)品：：Vero C1008細胞、SKNEP1細胞、Madin Darby Canine Kidney細胞

EL 4細胞類似產(chǎn)品：：L5178Y細胞、Hs 294T細胞、HuH-28細胞

NCI-H295細胞類似產(chǎn)品：：NCIH2141細胞、HUC-1細胞、Keio University-19-19細胞

CAL-148細胞類似產(chǎn)品：：253J-Bladder-V細胞、T-47-D細胞、COLO680N細胞

Pfeiffer細胞類似產(chǎn)品：：L-Wnt-3A細胞、Melan-a細胞、HT clone H9細胞

H4-II-E-C3細胞類似產(chǎn)品：：Mel-624細胞、PL-45細胞、NCI-SNU-C2A細胞

BMU-S1細胞類似產(chǎn)品：：Caco 2細胞、NCI-H524細胞、NCIH841細胞

LN-382細胞類似產(chǎn)品：：W256細胞、SVGp12細胞、U-266細胞

HPMEC細胞類似產(chǎn)品：：Hela-mock細胞、GEO細胞、FAK+/+細胞

HCGC細胞類似產(chǎn)品：：BC3H-1細胞、PG-BE1細胞、OCUM-1細胞

NCIH747細胞類似產(chǎn)品：：SK Mel 1細胞、RFL-6細胞、U266BL細胞

M059J細胞類似產(chǎn)品：：Reuber-H-35 hepatoma細胞、RPE D407細胞、CFSC-8B細胞

HeLa S 3細胞類似產(chǎn)品：：YD-38細胞、C2BBe 1細胞、L-363細胞

CL-11細胞類似產(chǎn)品：：University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1細胞、MGH-U3 (RN)細胞、RC13細胞

NCIH209細胞類似產(chǎn)品：：LA-N-5細胞、Capan 1細胞、VE細胞

H.Ep. No. 2細胞類似產(chǎn)品：：RBL 2H3細胞、Immortalized Human Hepatocytes細胞、OVCAR8/ADR細胞

Panc_08_13細胞類似產(chǎn)品：：CCD-112CoN細胞、Jurkat 77細胞、PCI-4M細胞

H-2110細胞類似產(chǎn)品：：RCC 786-O細胞、Hs-729-T細胞、WC00079細胞

SF763細胞類似產(chǎn)品：：H510A細胞、MONO-MAC 6細胞、PBMC細胞

HFL-1細胞類似產(chǎn)品：：CCRF-SB細胞、RCC10RGB細胞、H196細胞

OCI-Ly01細胞類似產(chǎn)品：：Hs 578Bst細胞、COLO 699細胞、E6-1細胞

Tn5 B1-4細胞類似產(chǎn)品：：CORL51細胞、UCLA-RO 81細胞、B-3細胞

T2細胞類似產(chǎn)品：：HCC-38細胞、Mel-624細胞、Hs-695-T細胞

NOZC-1細胞類似產(chǎn)品：：F442A細胞、MFE-280細胞、Hs 636.T細胞

ARO81細胞類似產(chǎn)品：：SN12C細胞、Y3-Ag1,2,3細胞、Baby Hamster Kidney from litter No. 21細胞

G361mel細胞類似產(chǎn)品：：VP 267細胞、HCC-202細胞、HPB/ALL細胞

EFO 27細胞類似產(chǎn)品：：TU 686細胞、Kit-225細胞、JB6 [Mouse]細胞

EFO 27細胞類似產(chǎn)品：：TU 686細胞、Kit-225細胞、JB6 [Mouse]細胞

J774A.1細胞類似產(chǎn)品：：32D:cl3細胞、UCLA-SO-14細胞、U-138-MG細胞

DMS 53細胞類似產(chǎn)品：：CCRF-CEM C7細胞、VB細胞、Eca 109細胞

HCC2218細胞類似產(chǎn)品：：Hs 819.T細胞、rHSC-99細胞、HCC-78細胞

Murine Lung Epithelial-12細胞類似產(chǎn)品：：OCI-LY-10細胞、JEG3細胞、HBVP細胞

NCI-H358細胞類似產(chǎn)品：：OCI Ly3細胞、3T3F442A細胞、WPMY1細胞

M21細胞類似產(chǎn)品：：NCIH1385細胞、RKO細胞、SKCO 1細胞

Panc-02細胞類似產(chǎn)品：：UM-UC3細胞、LC-2 ad細胞、MARC-145細胞

PC 61-5-3細胞類似產(chǎn)品：：GM637細胞、NIH-3T3細胞、BNL.CL2細胞

LM(TK-)細胞類似產(chǎn)品：：HCC0015細胞、373 MG細胞、B/C3T3細胞

CL1-5細胞類似產(chǎn)品：：HuH-1細胞、HEp-2細胞、SW 626細胞

ETCC-007細胞類似產(chǎn)品：：HEL-92-1-7細胞、UT-7細胞、HCC1187細胞

Hela-mock細胞類似產(chǎn)品：：LS-123細胞、HCV 29細胞、Hs 578.Bst細胞

R 1610細胞類似產(chǎn)品：：E0771細胞、PA1細胞、MLE12細胞

CAL-33細胞類似產(chǎn)品：：COLO 678細胞、WM451細胞、hTERT-HPNE細胞

HHL-5細胞類似產(chǎn)品：：PL 5細胞、NCI-H1963細胞、LAD2細胞

KM12-SM細胞類似產(chǎn)品：：143B TK-細胞、Potorous tridactylus Kidney 2細胞、HLFa細胞

B-104細胞類似產(chǎn)品：：COLO-320DM細胞、SaOS細胞、RMS 13細胞

PANC0327細胞類似產(chǎn)品：：3T3 L1細胞、EU-2細胞、Granta-519細胞

SW837細胞類似產(chǎn)品：：MRC 5細胞、293AD細胞、EBC-1細胞

PLB985細胞類似產(chǎn)品：：Pro-5WgaRI3C細胞、P30-OHKUBO細胞、Panc-05.04細胞

Walker256細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H1993細胞、kms 11細胞、624mel細胞

JM1細胞類似產(chǎn)品：：MG-HU-3細胞、MOLT 4細胞、S3-HeLa細胞

GH3細胞類似產(chǎn)品：：UPCI-SCC090細胞、HCT15細胞、293T細胞

NCI-H209:人小細胞肺癌復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

LNCaP-ATCC細胞類似產(chǎn)品：：MLA 144細胞、Japanese Tissue Culture-28細胞、P3HRI細胞

BRL 3A細胞類似產(chǎn)品：：PFSK細胞、UO.31細胞、HCC1954BL細胞

Transformed Human Liver Epithelial-2細胞類似產(chǎn)品：：OKT3細胞、MOLM-13細胞、RAW264細胞

P3JHR-1細胞類似產(chǎn)品：：SV40-MES13細胞、NCI-H920細胞、SKNBE細胞

7860細胞類似產(chǎn)品：：HPAF II細胞、IMR90細胞、RS411細胞

GM0637細胞類似產(chǎn)品：：SUM149細胞、TOV112D細胞、Leukemic 1210細胞

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