"Melan-a Cells(贈送Str鑒定報告)|小鼠黑色素細胞

細胞背景資料：黑色素細胞；自發(fā)永生；C５７BL/６

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

接收細胞相關問題：如不能在收到細胞后及時操作細胞，T２５及離心管發(fā)貨的細胞將可以消毒后在３７度過夜，血清發(fā)貨的細胞在室溫下靜置１-２天(注意不要放冰箱)，干冰發(fā)貨的可以在確認干冰未完全升華時將細胞直接放回液氮或者-８０度冰箱，若干冰完全升華，請即刻復蘇細胞。T２５瓶及離心管在培養(yǎng)箱平衡是為了讓細胞盡快適應培養(yǎng)箱環(huán)境，同時使部分因運輸導致脫落的細胞貼壁，此步驟非常必要。T２５瓶如果在顯微鏡下可以看到部分不貼壁的細胞，可以收集上清后離心(１２００rpm，５min)后，將沉淀用新的培養(yǎng)基重懸后接種至新的培養(yǎng)瓶或皿中。部分細胞在運輸過程中，由于不斷震蕩及環(huán)境不適，可能導致細胞破碎死亡，從而使培養(yǎng)基中漂浮很多細胞碎片及顆粒狀物質。這種情況下，平衡后，貼壁細胞用PBS洗兩遍再加新的培養(yǎng)基培養(yǎng)或者傳代至新瓶中培養(yǎng)即可；懸浮細胞可以離心(１０００rpm，３min)收集細胞，并用PBS重懸后再離心一次，再用新的培養(yǎng)基重懸并接種細胞。

細胞生長：貼壁

Calu 6細胞類似產品：：LAN6細胞、H220細胞、K299細胞

AE 1201細胞類似產品：：Ly10細胞、L-5178-Y細胞、SNU-1040細胞

SNU-668細胞類似產品：：Mac-1細胞、EU-4細胞、NCI-H660細胞

KTC1細胞類似產品：：VMM39細胞、3T3 Swiss Albino細胞、HCC-94細胞

LS 1034細胞類似產品：：MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)細胞、LY細胞、OVCA 433細胞

Melan-a Cells(贈送Str鑒定報告)|小鼠黑色素細胞

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

[細胞產品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

在細胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細胞生長角度來說，針對細胞培養(yǎng)過程中生長不HAO、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對應的解決方法。一、培養(yǎng)細胞生長不HAO》可能原因：細胞本身的狀態(tài)》1)細胞傳代次數(shù)多，細胞老化；2)細胞的接種量：接種量過低，細胞生長緩慢；3)細胞傳代時間過晚：細胞中毒，影響傳代后的細胞生長；4)胰酶消化時間過長或過短：時間過長，細胞死亡；時間過短，細胞未完全分離而成團，細胞死亡；5)細胞的凍存與復蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進行驗證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個方面的可能原因，做出針對性的解決方案》1)注意細胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，ZuiHAO經過驗證；4)注意實驗室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內無CO2；2)培養(yǎng)箱內溫度波動太大；3)細胞凍存或復蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產物堆積；解決方法：1)檢測培養(yǎng)箱內CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內溫度；3)取新的保存細胞種；4)檢測培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。

細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

SF-767細胞類似產品：：SNU251細胞、IOSE-Mar細胞、CT 26細胞

Rat Lung-65細胞類似產品：：M-07e細胞、OCI Ly3細胞、Mv.1.Lu細胞

HCC0078細胞類似產品：：HT144細胞、OVCAR-4細胞、HRCEC細胞

SNU-C2B細胞類似產品：：MDA-MB-435細胞、H-82細胞、HuLEC-5a細胞

5637細胞類似產品：：2T細胞、H292細胞、SUP T1細胞

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

Melan-a Cells(贈送Str鑒定報告)|小鼠黑色素細胞

細胞生長特性：貼壁

PaTu8988s細胞類似產品：：Hs863T細胞、HCEC-B4G12細胞、HPBALL細胞

H-187細胞類似產品：：Hs27F細胞、MDA-MB468細胞、JTC-39細胞

SKN-AS細胞類似產品：：NCI-H1238細胞、Glioma-261細胞、Earle's L cells細胞

HuTu 80細胞類似產品：：BT483細胞、MPC-83細胞、Nakata-1細胞

U-343細胞類似產品：：P3HR1-BL細胞、HCCC9810細胞、786-0細胞

HEL細胞類似產品：：OSA細胞、MPP 89細胞、MDAMB175VII細胞

為什么培養(yǎng)的細胞要及時傳代？體外培養(yǎng)的細胞大多具有生長接觸抑制的性，也就是說當一個細胞被其他細胞包圍的時候，它就會停止生長，及時傳代后，細胞的生長得以繼續(xù)。培養(yǎng)細胞生長減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些？可能的原因有：更換了不同的培養(yǎng)液或血清；培養(yǎng)液中一些細胞生長必需成分如谷眈肢或生長因子等耗盡或缺乏或己被破壞；培養(yǎng)物中有少量細菌或真菌污染；試劑保存不當；比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分，比較新血清與舊血清等，找出其它可能的原因。解決辦法：增加起始培養(yǎng)細胞濃度；讓細胞逐漸適應新培養(yǎng)液；換入新鮮配制培養(yǎng)液；補加谷酷肢或生長因子等；用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng)，如發(fā)現(xiàn)污染，去棄培養(yǎng)物，或用抗生素除菌；血清需保存在５℃到２０℃; 培養(yǎng)液需在２-８℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在２-８℃保存，并在２周內用完;分離培養(yǎng)物，檢測支原體。冷凍管應如何解凍？取出冷凍管后，須立即放入３７℃水槽中快速解凍，輕搖冷凍管使其在１-２分鐘內大部分融化，別注意，需殘留一小塊冰塊，就可拿到超凈工作臺操作細胞，用７５%酒精消毒凍存管，用新鮮培養(yǎng)基將細胞轉移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時，必須注意安全，預防冷凍管爆裂。

細胞傳代培養(yǎng)實驗：體外培養(yǎng)的原代細胞或細胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代，以便獲得穩(wěn)定的細胞株或得到大量的同種細胞，并維持細胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細胞形成單層匯合以后，由于密度過大生存空間不足而引起營養(yǎng)枯竭，將培養(yǎng)的細胞分散，從容器中取出，以１:２或１:３以上的比率轉移到另外的容器中進行培養(yǎng)，即為傳代培養(yǎng)；細胞“一代”指從細胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間，與細胞世代或倍增不同。在一代中，細胞培增３～６次。細胞傳代后，一般經過三個階段：游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細胞分裂指數(shù)表示細胞增殖的旺盛程度，即細胞群的分裂相數(shù)/１００個細胞。一般細胞分裂指數(shù)介于０.２％～０.５％，腫瘤細胞可達３～５％；細胞接種２～３天分裂增殖旺盛，是活力ZuiHAO時期，稱指數(shù)增生期(對數(shù)生長期)，適宜進行各種試驗。實驗步驟：１.將長成的培養(yǎng)細胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出，在超凈工作臺中倒掉瓶內的培養(yǎng)液，加入少許消化液。(以液面蓋住細胞為宜)，靜置５～１０分鐘。２.在倒置鏡下觀察被消化的細胞，如果細胞變圓，相互之間不再連接成片，這時應立即在超凈臺中將消化液倒掉，加入３～５ml新鮮培養(yǎng)液，吹打，制成細胞懸液。３.將細胞懸液吸出２ml左右，加到另一個培養(yǎng)瓶中并向每個瓶中分別加３ml左右培養(yǎng)液，蓋HAO瓶塞，送回二氧化碳培養(yǎng)箱中，繼續(xù)進行培養(yǎng)。一般情況，傳代后的細胞在２小時左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上，２～４天就可在瓶內形成單層，需要再次進行傳代。

HPBALL細胞類似產品：：HBL100細胞、FDCP1細胞、3T3-F442A細胞

H520細胞類似產品：：EoL-1 cell細胞、NCIH660細胞、MLA-144細胞

3LL細胞類似產品：：HT-22細胞、PA-TU S細胞、SH-SY5Y Parental細胞

Alpha Mouse Liver 12細胞類似產品：：KTC-1細胞、COV-362細胞、EAhy 926細胞

2PK-3細胞類似產品：：OC-3-VGH細胞、MLA 144細胞、A 2780 CP細胞

SW-579細胞類似產品：：OCI/AML3細胞、M-G63細胞、MAVER細胞

Nb 2細胞類似產品：：3T3F442A細胞、A-549細胞、G401細胞

Caki2細胞類似產品：：BE2C細胞、OKT 3細胞、CAL-78細胞

FTC-133細胞類似產品：：SNU-C1細胞、SNU-251細胞、NSC34細胞

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NCI-H87細胞類似產品：：7404細胞、RH-35細胞、COLO824細胞

SNU-119細胞類似產品：：HL7702細胞、IBRS2細胞、PaCa2細胞

Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a細胞類似產品：：HS940細胞、S.B.細胞、Ca761細胞

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Madin-Darby Bovine Kidney細胞類似產品：：C3H/10T1/2細胞、WM 239-A細胞、U-266 AR1細胞

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RPMI1846細胞類似產品：：KYSE50細胞、RSC-96細胞、HASMC細胞

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BE(2)-C細胞類似產品：：NCI-H209細胞、MESSA/Dx5細胞、COLO679細胞

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SU-DHL6細胞類似產品：：HuT78細胞、NCI-H661細胞、IOSE-29細胞

NCIH740細胞類似產品：：95C細胞、NCI-H3255細胞、CCC-HHM-2細胞

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Jurkat 77細胞類似產品：：QBI-293A細胞、M.D. Anderson-Prostate Cancer-2b細胞、Kupffer細胞

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KOSC-2 cl3-43細胞類似產品：：Calu6細胞、MDCC-MSB1細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII細胞

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D283細胞類似產品：：SKMEL3細胞、Intestinal Epithelioid Cell line No. 18細胞、Det 562細胞

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Y3-Ag1.2.3細胞類似產品：：HuH1細胞、NBL-1細胞、ETCC007細胞

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SNU-761細胞類似產品：：HM1900細胞、MES 13細胞、769P細胞

GM03190細胞類似產品：：H-1092細胞、H69細胞、WiDr/S細胞

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RKOAS451細胞類似產品：：T2(174 x CEM.T2)細胞、H-2141細胞、H-820細胞

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SRA01/04 (HLE)細胞類似產品：：AMO-1細胞、SBC3細胞、3-LL細胞

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Melan-a Cells(贈送Str鑒定報告)|小鼠黑色素細胞

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