I型核酸染色劑
I型核酸染色劑 性質(zhì)
GoldView 是一種可替代溴化乙錠(EB)的新型核酸(DNA)染料,采用瓊脂糖凝膠電泳檢測DNA時,其與DNA發(fā)生結(jié)合并產(chǎn)生很強的熒光信號,靈敏度與 EB 相當,使用方法與之完全相同。在紫外透射光下雙鏈DNA呈現(xiàn)綠色熒光,而單鏈DNA呈現(xiàn)紅色熒光。通過小鼠皮下注射實驗,尚未發(fā)現(xiàn)GoldView有致癌作用;而溴化乙錠(EB)是一種強致癌劑,因此用GoldView代替EB不失為一種明智的選擇。GoldView特別適合大片段(>1 kb)DNA的檢測,靈敏度高。也可用于RNA的染色。
【網(wǎng)絡(luò)推薦】
GoldView屬吖啶類染料,低毒性,基本不致癌,EB,中等毒性,強致癌性。GoldView的效果比EB略微差一點,但替代EB問題不大,價格一般都是90元錢500ul,50ml的膠放3-5ul即可,如果買賽百盛的,價錢一樣,濃度高一些,可以放的更少。
如果想找到效果比EB更好,無毒的染料,那么選擇花箐類的染料,靈敏度好,背景低,但價格較貴,而且不知道為什么,曾經(jīng)用過一種跑出來的條帶是彎的,必須對PCR產(chǎn)物進行預(yù)染,可能與分子攜帶的電荷有關(guān)。
總之,我覺得用GoldView替代EB,還是比較不錯的選擇。
2) 加入GoldView的瓊脂糖凝膠反復(fù)融化可能會對核酸檢測的靈敏度產(chǎn)生一定影響。
3) GoldView特別適用于大片段(>1 kb)DNA的檢測。對于更小片段的DNA,特別是<500bp檢測信號可能很弱或者無信號。對于<500bp的DNA染色,建議使用SYBR Green I 核酸染料。
4) 含GoldView的凝膠不適合進行膠回收實驗。
5) Goldview的主要成分是吖啶橙,具有細胞滲透性,有一定的細胞毒性。建議操作人員使用時做好防護措施,帶上手套和口罩。并妥善處理好廢棄物。
6) 另提供無毒的EB替代物-Dured核酸染料(貨號:10202ES76),強烈推薦使用。
7) 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
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GoldView屬吖啶類染料,低毒性,基本不致癌,EB,中等毒性,強致癌性。GoldView的效果比EB略微差一點,但替代EB問題不大,價格一般都是90元錢500ul,50ml的膠放3-5ul即可,如果買賽百盛的,價錢一樣,濃度高一些,可以放的更少。
如果想找到效果比EB更好,無毒的染料,那么選擇花箐類的染料,靈敏度好,背景低,但價格較貴,而且不知道為什么,曾經(jīng)用過一種跑出來的條帶是彎的,必須對PCR產(chǎn)物進行預(yù)染,可能與分子攜帶的電荷有關(guān)。
總之,我覺得用GoldView替代EB,還是比較不錯的選擇。
- 將100 ml瓊脂糖凝膠溶液(濃度一般為0.8%-2%)在微波爐中融化。
- 冷卻至60℃左右(不燙手)后加入5-10 μl GoldView(若背景過高可以適當減少用量;若靈敏度過低,可以適當增加用量),輕輕搖勻,避免產(chǎn)生氣泡。
- 冷卻至不燙手時倒膠,待瓊脂糖凝膠完全凝固后上樣電泳。
- 電泳完畢,使用凝膠成像系統(tǒng)或可見光透射儀觀測。注:若使用凝膠成像系統(tǒng)照相時,通過調(diào)節(jié)光圈、曝光時間選擇合適的濾光片,可得到成像清晰、背景較低的照片。
2) 加入GoldView的瓊脂糖凝膠反復(fù)融化可能會對核酸檢測的靈敏度產(chǎn)生一定影響。
3) GoldView特別適用于大片段(>1 kb)DNA的檢測。對于更小片段的DNA,特別是<500bp檢測信號可能很弱或者無信號。對于<500bp的DNA染色,建議使用SYBR Green I 核酸染料。
4) 含GoldView的凝膠不適合進行膠回收實驗。
5) Goldview的主要成分是吖啶橙,具有細胞滲透性,有一定的細胞毒性。建議操作人員使用時做好防護措施,帶上手套和口罩。并妥善處理好廢棄物。
6) 另提供無毒的EB替代物-Dured核酸染料(貨號:10202ES76),強烈推薦使用。
7) 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
用途
一種可代替溴化乙錠(EB)的新型DNA染料,其靈敏度與EB相當,使用方法與之完全相同。在紫外燈下雙鏈DNA呈現(xiàn)綠色熒光,而單鏈DNA呈紅色熒光,低毒性,主要針對500bp以上的片段。