9007-81-2
中文名稱
弗氏完全佐劑
CAS
9007-81-2
分子式
C9H12FN3O5
更新日期
2023/12/15 11:27:26
安全數(shù)據(jù)
警示詞危險(xiǎn)
危險(xiǎn)性描述H304
防范說(shuō)明P301+P310-P331-P405-P501
安全說(shuō)明23-24/25
WGK Germany3
RTECS號(hào)LS6860000
常見(jiàn)問(wèn)題列表
免疫佐劑
免疫佐劑是一類本身沒(méi)有抗原性，但與抗原一同注入動(dòng)物體內(nèi)能通過(guò)延緩抗原排除而增強(qiáng)免疫效果的制劑。最常用的免疫佐劑是弗氏不完全佐劑和弗氏完全佐劑。前者是將抗原與礦物油、乳化劑(如羊毛脂)混勻形成油包水乳劑，使抗原進(jìn)入動(dòng)物組織后能緩慢釋出；在弗氏不完全佐劑中加入卡介苗等細(xì)菌制劑可以刺激動(dòng)物的免疫系統(tǒng)，非特異性地提高免疫應(yīng)答水平，稱為弗氏佐劑。弗氏完全佐劑是用礦物油(石臘油)、乳化劑(如羊毛脂)和滅活的結(jié)核桿菌制成的油色冰型乳化劑。在實(shí)驗(yàn)免疫學(xué)中，可用本品促進(jìn)弱抗原物質(zhì)抗體的生成。在藥理學(xué)中，可用它制造動(dòng)物關(guān)節(jié)炎模型(佐劑性關(guān)節(jié)炎)。該佐劑是由美籍匈牙利細(xì)菌學(xué)家JulesThomas Freund(1891—1960)發(fā)明的，故以其名子命名。因該佐劑中含分枝桿菌，故又稱為分枝桿菌佐劑。不含分枝桿菌者為弗氏不完全佐劑。
弗氏佐劑
弗氏佐劑是一種同抗原一起或預(yù)先注入機(jī)體，能增強(qiáng)免疫原性，或改變免疫反應(yīng)類型的物質(zhì)。佐劑的種類很多，有氫氧化鋁、甲基纖維素、百日咳菌苗等，以弗氏佐劑最為常用，弗氏佐劑分為不完全佐劑及完全佐劑兩種。完全佐劑的免疫原性強(qiáng)，易在注射部位形成肉芽腫和持久性潰瘍，造成較嚴(yán)重的組織損傷，因而主要用于動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，不運(yùn)用于人體。作用機(jī)制
免疫佐劑是指與抗原混合后注入動(dòng)物體內(nèi)，能增強(qiáng)抗原性和機(jī)體免疫應(yīng)答的一類物質(zhì)。免疫佐劑的作用：①能使弱抗原物質(zhì)增強(qiáng)抗原性；
②增加特異性循環(huán)抗體水平，或產(chǎn)生有效的保護(hù)性免疫；
③改變所產(chǎn)生的循環(huán)抗體類型；
④增強(qiáng)細(xì)胞介導(dǎo)的超敏反應(yīng)能力；
⑤保護(hù)抗原(特別是DNA、RNA)不受體內(nèi)酶的分解。
佐劑對(duì)某些分子量小的多糖或多肽抗原性微弱的物質(zhì)，尤能增強(qiáng)其產(chǎn)生特異性反應(yīng)的作用。
弗氏不完全佐劑與弗氏完全佐劑的區(qū)別
弗氏完全佐劑是一種油包水的乳濁液，能夠非常有效的誘導(dǎo)產(chǎn)生高滴度的抗體。弗氏完全佐劑含結(jié)核分枝桿菌的細(xì)胞壁成分，可以加強(qiáng)對(duì)抗原的抗體反應(yīng)。佐劑活性來(lái)自于油滴中免疫原的持續(xù)釋放，并刺激局部免疫反應(yīng)。弗氏不完全佐劑用于初次免疫刺激。為了減少副作用，不含結(jié)核分枝桿菌成分的弗氏不完全佐劑用于加強(qiáng)免疫。弗氏佐劑制備方法
弗氏佐劑是現(xiàn)在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中最常用的佐劑，分為不完全弗氏佐劑和完全弗氏佐劑。不完全弗氏佐劑是液體石蠟與羊毛脂混合而成，組分比為1～5：1，可根據(jù)需要而定，通常為2：1。不完全佐劑中加卡介苗(最終濃度為2～20mg/ml)或死的結(jié)核分枝桿菌，即為完全弗氏佐劑（FCA）。一般首次注射時(shí)用1／2體積FCA加上1／2體積的抗原進(jìn)行乳化，第二次或第三次注射時(shí)用不完全佐劑或不用佐劑。如不加佐劑，則抗原量增大10-20倍。配制方法：按比例將羊毛脂與石蠟油置容器內(nèi)，用超聲波使之混勻，高壓滅菌，置4℃下保存?zhèn)溆谩?br /> 在免疫動(dòng)物前，先將弗氏佐劑與抗原按一定比例混合，佐劑和抗原體積比一般為1：1，制備成"油包水"乳狀液。因?yàn)楹琒DS很易促使其乳化成油包水抗原乳化復(fù)合物，注射入動(dòng)物體內(nèi)時(shí)一定要保持乳化狀態(tài)。抗原用量視抗原分子量不同及免疫原性及免疫動(dòng)物不同而有一定差異，無(wú)統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)和固定模式。一般是每兔（約2kg重）或每羊（約20kg重）第1次注射抗原1mg，以后逐次增加抗原量，最多每次不超過(guò)3mg。
佐劑與抗原乳化可按如下方法進(jìn)行：
（1）研磨法：先將佐劑加熱并取適量放入無(wú)菌的玻璃研缽內(nèi)，待冷卻后再緩緩滴入等體積的抗原溶液，邊滴邊按同一方向研磨，滴加抗原的速度要慢。待抗原全部加入后，繼續(xù)研磨一段時(shí)間，使之成為乳白色粘稠的油包水乳劑。本法適于制備大量的佐劑抗原，缺點(diǎn)是研缽壁上粘附大量乳劑，抗原損失較大。
（2）注射器混合法：將等量的弗氏佐劑和抗原溶液分別吸入兩個(gè)注射器內(nèi)，兩注射器之間以一細(xì)膠管相連，注意排凈空氣，然后交替推動(dòng)針管，直至形成粘稠的乳劑為止。本法優(yōu)點(diǎn)是容易做到無(wú)菌操作，抗原損失少，適用于制備少量的抗原乳劑。但同時(shí)難以乳化完全，個(gè)別抗原，用塑料注射器根本推不動(dòng)，而用玻璃注射器又有滲漏。制備好的乳化劑經(jīng)鑒定才能適用。鑒定方法是將乳化劑滴入冷水中，若保持完整不分散，成滴狀浮于水面，即乳化完全，為合格的油包水劑。
（3）超聲：實(shí)驗(yàn)室條件好點(diǎn)的，比如說(shuō)有超聲破碎儀的，一定要控制超聲頻率和時(shí)間，超聲容易激發(fā)一些自由基，對(duì)抗原有未知損害。乳化方法要根據(jù)抗原和需要而定。
主要應(yīng)用
1、弗氏佐劑可用于制備免疫原的油包水乳液。由于抗原釋放緩慢，油包水乳液中的抗原可刺激高效長(zhǎng)期的抗體應(yīng)答。2、弗氏完全佐劑中的分枝桿菌可將巨噬細(xì)胞和其他細(xì)胞吸引到注射部位，從而增強(qiáng)免疫應(yīng)答。鑒于此原因，將弗氏完全佐劑用于初始注射，而將弗氏不完全佐劑用于隨后的加強(qiáng)注射。
3、Sigma公司的弗氏完全佐劑規(guī)格：產(chǎn)品編號(hào)：F5881；每毫升含1mg熱滅活的干燥結(jié)核分枝桿菌 (H37Ra, ATCC 25177)、0.85mL石蠟油和0.15mL二縮甘露醇一油酸。
有關(guān)弗氏完全佐劑的信息由Chemicalbook的彤彤編輯整理（2015-09-21）。