9001-63-2
中文名稱
溶菌酶
英文名稱
LYSOZYME
CAS
9001-63-2
分子式
C11H20NO6-
分子量
262.28
MOL 文件
9001-63-2.mol
更新日期
2025/01/14 09:04:40
9001-63-2 結(jié)構(gòu)式
基本信息
中文別名
胞壁質(zhì)酶溶菌酶素
球蛋白G
溶菌酶 現(xiàn)貨供應(yīng)
N-乙酰胞壁質(zhì)聚糖水解酶
溶菌酶 來源于人類中性粒細(xì)胞
英文別名
LYSOZYMglobuling
lysozymeg
Antalzyme
delvozyme
MURAMIDASE
globuling1
Aids072619
Lysozyme c
Lydium-KLP
所屬類別
生物化學(xué)品: 酶類: 治療用酶物理化學(xué)性質(zhì)
外觀性狀原料處理取新鮮雞蛋清中得到的一種能分解粘多糖的酶制品，為白色或微白色的結(jié)晶性或我定型粉末，無臭，味甜。易溶于水，不溶于丙酮、乙醚。在酸性溶液中十分穩(wěn)定，水溶液遇堿易被破壞。最適Ph為6.6，等電點(diǎn)pI=10.5～11。耐熱至550時(shí)活性不被破壞。溶菌酶為一種堿性蛋白質(zhì)。常與氯離子結(jié)合成為溶菌酶氯化物。
儲存條件2-8°C
溶解度溶于二甲基亞砜
形態(tài)powder
顏色white
Merck13,5660
序列H-Arg-Val-Val-Arg-Asp-Pro-Gln-Gly-Ile-Arg-Ala-Trp-Val-Ala-Trp-Arg-Asn-Arg-OH
穩(wěn)定性穩(wěn)定的。與強(qiáng)氧化劑不相容。
EPA化學(xué)物質(zhì)信息Lysozyme (9001-63-2)
安全數(shù)據(jù)
制備方法
方法1
原料處理取新鮮或冰凍蛋清70kg，使pH在8左右，解凍過篩，除去蛋清中的臍帶、蛋殼碎片及其他雜質(zhì)。使溫度降到50左右（不得超過100），邊攪拌加加入724樹脂10kg（濕重），待樹脂全部懸浮在蛋清中，保持在0～50，攪拌吸附5h，再將蛋清移入冷庫0～50，靜置過夜。蛋清724樹脂；30C→吸附樹脂吸附物
去雜蛋白、洗脫、沉淀把上層清液傾出，用清水洗去樹脂表面附著的蛋白質(zhì)，反復(fù)慢慢清洗4次，以防止樹指流失。將樹脂抽濾除去水分。分3次將24L、pH6.5的磷酸（0.15mol/L）緩沖溶液加在樹脂中，每次加完后攪拌約15min，攪拌后減壓抽濾除去水分。再將18L硫酸銨（100g/L即10%），分4次洗脫溶菌酶，每次加完后攪拌0.5h，過濾抽干。合并洗脫液，在每升洗脫液中加入320g固體硫酸銨，使含量達(dá)到400g/L(40%)，此時(shí)有白色沉淀產(chǎn)生，冷處靜置過夜，次日虹吸上清液，沉淀離心分離，得粗品。
樹脂吸附物H2O；磷酸緩沖液→去雜蛋白吸附物(NH4)^2^）SO4→洗脫液(NH4)2SO4→沉淀粗品
透析將粗品加入1.5kg蒸餾水，使之完全溶解，將入透析袋，冷庫中透析24～36h，除去大部分硫酸銨，得透析液。
粗品蒸餾水；溶解→透析透析液
鹽析將澄清透析液，在不斷攪拌下慢慢滴加氫氧化鈉（1mol/L）,中和掉過量酸，使pH達(dá)8.5～9時(shí)，如有沉淀生成，應(yīng)立即離心除去、然后在不斷攪拌下加鹽酸（3mol/L），使溶液pH達(dá)到3.5，按體積每100ml酸性透析液緩緩加入固體氯化鈉5g，即有白色沉淀析出，在0～50冷庫放置2d，離心或過濾得溶菌酶沉淀 。
透析液^…
干燥在不斷攪拌，按照溶菌酶沉淀的質(zhì)量加入10倍于該量的冷卻至00C的無水丙酮，待顆粒權(quán)細(xì)，在冷處放置數(shù)小時(shí)，濾去丙酮，沉淀用真空干燥，直到無丙酮臭味為止，即得口服或外用溶菌酶原料。
濕溶菌酶丙酮；00C→干燥溶菌酶
制劑取干燥粉碎砂糖粉，每千克該糖粉中加入50g的滑石粉（即得5%），通過129目篩，加淀粉漿（50g/L 即5%）適量，在混合機(jī)內(nèi)攪拌均勻，制成軟材，過12目篩，700C烘干，用14目篩整顆，水分應(yīng)以控制在2%～4%左右。加入一定量溶菌酶粉混合，加1%硬脂酸酶，過16目篩2次，壓片，即得溶菌酶口含片，每片含溶菌酶20mg。
溶菌酶壓片→制劑口含片
方法2
從蛋清中提取制得。1.原料處理 新鮮或冰凍蛋清（或蛋殼水）70kg，用試紙測其pH值，應(yīng)在8.0左右，經(jīng)解凍后通過鉛篩，除去蛋清中的臍帶、蛋殼碎片及其他雜質(zhì)。2.吸附 用冰水冷卻并攪拌蛋清，使溫度降到5℃，緩緩加入724樹脂10kg，攪拌，使樹脂完全懸浮在蛋清中。保持溫度0-10℃，再繼續(xù)攪拌5h。將蛋清移入冷庫，在0-10℃靜置過液。3.洗滌、洗脫 隔天把上層蛋清清液傾出，下層用清水洗去附著的蛋白質(zhì)，先后共洗四次。最后將樹脂抽濾去水分，用24kg0.15M磷酸緩沖液（pH6.5）分三次加入樹脂攪拌，每次攪拌15min后抽濾去水分。然后用10%硫酸銨18kg，分4次洗脫溶菌酶。合并洗脫液，加入32%（重量/體積）固體硫酸銨使含量達(dá)40%，析出白色沉淀。在冷處放置過夜，過濾出沉淀。4.透析 將沉淀溶解于1.5L蒸餾水中，在冷庫內(nèi)透析24-36h，除去大部分硫酸銨。5.鹽析 透析完畢，將溶液用濾紙過濾，得澄清透析液。用滴管慢慢加入氫氧化鈉溶液，使pH上升到8.5-9.0，如有白色沉淀，應(yīng)即離心除去。然后在攪拌下加入3N鹽酸，使溶液pH為3.5。按體積緩緩加入5%固體氯化鈉，生成白色沉淀。在0-10℃冷庫放置48h，抽濾得到溶菌酶沉淀。6.干燥沉淀內(nèi)加入10倍量0℃無水丙酮，攪拌使顆粒松細(xì)，在冷處靜置數(shù)小時(shí)，濾去丙酮。沉淀用五氧化二磷真空干燥，即得口服或外用溶菌酶粉劑原料。如不用丙酮脫水，可將溶菌酶透析液冷凍干燥可得不含氯化鈉的溶菌酶成品。按蛋清重量計(jì)，收率0.1%。